other طراحی کیت الایزای ایمنی-تسخیری برای سنجش قدرت ایمنی‌زایی واکسن هاری مقاله اصیل Original Article <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:yekanyw;"><strong><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف:</span></strong><span style="font-size:10.0pt;"> ارزیابی ایمنی‌زایی واکسن هاری با یک روش ارزان، سریع، دارای دقت بالا و سازگار با ارزش‌های اخلاقی بسیار مهم است، بنابراین پژوهشگران به ارایه روش‌های گوناگونی از جمله انتشار یک طرفه شعاعی، روش آزمایشگاهی ارایه شده توسط انستیتوی سلامت ملی آمریکا پرداخته‌اند. مطالعه حاضر با هدف جایگزینی یک روش برون‌تنی سازگار با معیارهای اخلاق پزشکی به جای روش درون‌تنی انجام شد. با پذیرش این نکته که ایمنی‌زایی واکسن هاری، وابسته به مقدار آنتی‌ژن گلیکوپروتیینی موجود در آن است و این که آنتی‌بادی مونوکلونال تا خوردگی صحیح گلیکوپروتیین ویروس هاری را تشخیص می‌دهد، مقدار جزو گلیکوپروتیینی می‌تواند نشان‌دهنده مقدار ایمنی‌زا بودن واکسن باشد.</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">روش بررسی:</span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">این مطالعه کاربردی از شهریور ۱۳۹۵ تا شهریور ۱۳۹۷ در آزمایشگاه مرکز همکاری‌های سازمان بهداشت جهانی برای رفرانس و تحقیقات هاری انستیتو پاستور ایران در تهران انجام گرفت. ما برای تعیین مقدارگلیکوپروتیین ویروسی در واکسن‌های مختلف هاری یک الایزای ایمنی-تسخیری </span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">(Immune-capture enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> طراحی کردیم.</span><br> <strong><span style="font-size:10.0pt;">یافته‌ها:</span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">در منحنی استاندارد شیب خط برابر (۰/۰۰۱۳</span><span dir="LTR"><span style="font-size:8.0pt;">R2=۰/۹۸ (P=</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> محاسبه شد. در واکسن‌های انسانی میانگین بین ۷/۳۶۶-۵/۵۵۴ (انحراف‌معیار ۰/۱۰۳۹-۰/۰۴۶۳ به‌ترتیب) و ضریب تغییرات ۲/۴۳۶-۰/۷۷۸ و در واکسن‌های حیوانی میانگین ۵/۹۹۳-۲/۲۹۳ (انحراف‌معیارها ۰/۲۷۲۴-۰/۰۰۴۱) و ضریب تغییرات ۴/۵۴۶-۰/۱۸۲ تعیین گردید. برای واکسن حیوانی ضریب همبستگی پیرسون ۰/۹۹ و برای واکسن انسانی این ضریب ۰/۹۵ به‌دست آمد. همچنین ضریب همبستگی توافقی برای واکسن حیوانی ۰/۹۸ و برای واکسن انسانی ۰/۹۸ بود که نشان‌دهنده وجود توافق متوسط رو به بالا در نمونه‌های واکسن‌های انسانی و حیوانی است.</span><br> <strong><span dir="RTL"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری:</span></span></strong> <span dir="RTL"><span style="font-size:10.0pt;">کیت الایزای طراحی شده دارای تکرارپذیری، دقت بینابینی و استواری مناسبی برای سنجش میزان گلیکوپروتیینی واکسن هاری بود که ارتباط مستقیمی با ایمنی‌زایی واکسن داشت.</span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background</strong>: Potency evaluation of rabies vaccine is a cheap, fast, high precision and consistent with ethical values is critical, so researchers have modified a variety of methods such as: National Institute of Health (NIH) method, Single Radial Immunodiffusion (SRID) and so on. The purpose of the present study was to replace an in vitro method consistent with medical ethics criteria instead of an in vivo method. By recognizing that the potency of the rabies vaccine depends on the amount of glycoprotein antigen content and the monoclonal antibody detect the correct folding of antigen of the rabies virus, then the glycoprotein content could be represent of vaccine potency.<br> <strong>Methods</strong>: In this study, we designed an immune-capture enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with three antibodies (capture, primary and secondary) to determine the existent amount of viral glycoprotein in different rabies vaccines, and compared the results at the same time with measuring potency of those vaccines using the NIH method. This applied study was conducted from September 2016 to September 2018 at the Research Laboratory of the World Health Organization Collaborating Center for reference and research on rabies at the Pasteur Institute of Iran in Tehran.<br> <strong>Results</strong>: The slope of the standard line was calculated to R2=0.98 (P=0.0013). In the humans&rsquo; vaccines, the mean lied between 5.554-7.336 (SD=0.0463-0.1039) and the coefficient of variation was 0.778-2.436 (SD=0.0041-0.2724), at the same time in the animals&rsquo; vaccines the mean were 2.293-5.993 (SD=0.0041-0.2724) and the coefficient of variation was calculated 0.182-4.546. For animal vaccines the Pearson correlation coefficient is 0.99 and for the human vaccines this coefficient was 0.95. Also, the concordance correlation coefficient for animal vaccines was 0.98 and for human vaccines is 0.95, indicating a moderate to high concordance in both animals and humans vaccines.<br> <strong>Conclusion</strong>: The designed Immuno-capture ELISA kit had a proper acceptance criterion, intermediate precision, good linearity and robustness for measuring the glycoprotein level of the vaccine, which was directly related to the vaccine potency.</div> الایزا ,انستیتوی سلامت ملی آمریکا, گلیکوپروتیین ویروس هاری, قدرت ایمنی‌زایی واکسن enzyme-linked immunosorbent assay, National Institutes of Health (U.S.), rabies virus glycoprotein, vaccine potency 740 745 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3666-229&slc_lang=other&sid=1 Farzaneh Sheikholeslami فرزانه شیخ‌الاسلامی f_sheikh@psateur.ac.ir Yes Department of Virology, WHO Collaborating Center for Reference and Research on Rabies, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran. گروه تحقیقات ویروس‌شناسی، مرکز همکاری‌های سازمان بهداشت جهانی برای رفرانس و تحقیقات هاری، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران. Safoora Gharibzadeh صفورا غریب‌زاده No Department of Epidemiology and Biostatistics, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran. گروه اپیدمیولوژی و آمار زیستی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران. Gharibzadeh احسان مصطفوی No Department of Epidemiology and Biostatistics, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran. گروه اپیدمیولوژی و آمار زیستی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران. Nargess Miyandehi نرگس میاندهی No Department of Viral Vaccines, Research and Production Complex of Pasteur Institute of Iran, Karaj, Iran. بخش واکسن‌های ویروسی، مجتمع تولیدی تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران، کرج، ایران. Farzaneh Ahmadnejad فرزانه احمدنژاد No Department of Viral Vaccines, Research and Production Complex of Pasteur Institute of Iran, Karaj, Iran. بخش واکسن‌های ویروسی، مجتمع تولیدی تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران، کرج، ایران. Saeed Godeyri Eslami سعید جدیری اسلامی No Department of Quality Control, Research and Production Complex of Pasteur Institute, Karaj, Iran. بخش کنترل کیفیت، مجتمع تولیدی تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران، کرج، ایران. Javad Vaez جواد واعظ No Department of Quality Control, Research and Production Complex of Pasteur Institute, Karaj, Iran. بخش ایمنی سلامت و محیط، مجتمع تولیدی تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران، کرج، ایران. Ali Moradi علی مرادی No Department of Health, Safety and Environment, Research and Production Complex of Pasteur Institute of Iran, Karaj, Iran. بخش ایمنی سلامت و محیط، مجتمع تولیدی تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران، کرج، ایران.