Tehran University Medical Journal

other نقش بیان موقت miR-182 و miR-183 در القای ویژگی‌های شبه‌گیرنده نوری در سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان The transient role of miR-182 and miR-183 expression in inducing photoreceptor-like characteristics in human bone marrow-derived mesenchymal stem cells مقاله اصیل Original Article زمینه و هدف: مرگ سلول‌های گیرنده نوری شبکیه، یکی از عوامل اصلی بروز دژنراسیون شبکیه محسوب می‌شود که تاکنون درمان مؤثری برای آن معرفی نشده است. مطالعات بالینی و پیش‌بالینی نشان می‌دهند که استفاده از سلول‌های بنیادی، رویکردی امید بخش در درمان این بیماری‌هاست. همچنین شواهد موجود حاکی از آن است که miRNA-182 و miRNA-183 نقش‌های کلیدی در رشد، تمایز و بقای گیرنده‌های نوری در مدل‌های حیوانی ایفا می‌کنند. بنابراین، هدف این مطالعه القای ویژگی‌های شبه‌گیرنده نوری در سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان از طریق افزایش بیان miR-182 وmiR-183  است. روش بررسی: این مطالعه تجربی در بازه زمانی فروردین ۱۳۹۸ تا اسفند ۱۳۹۹ در مرکز تحقیقات بیوشیمی بالینی دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد انجام شد. در این مطالعه، تاثیر افزایش بیان miRNA-182 و miRNA-183 بر تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان (hBMSCs) به سلول‌های شبه گیرنده نوری بررسی شد. برای این منظور، miRNA-182 و miRNA-183 به hBMSCs ترانسفکت شدند و سطح بیان آن‌ها با روش Real-Time PCR ارزیابی گردید. همچنین، بیان ژن‌های اختصاصی شبکیه شامل OTX2، NRL، SLC1A1، PKC و Recoverin با استفاده از روش Real-Time PCR بررسی شد. یافته‌ها: یافته‌ها نشان دادند که ترانسفکشن hBMSCs با miRNA-182 و miRNA-183 به کمک لیپوفکتامین، منجر به افزایش معنادار بیان ژن‌های مرتبط با تمایز شبکیه ازجمله CRX، OTX2، PKCα، Recoverin، NRL و RHO گردید. نتیجه‌گیری: نتایج این پژوهش بیانگر آن است که افزایش بیان miRNA-182 و miRNA-183 می‌تواند به‌طور بالقوه تمایز سلول‌های hBMSCs را به سلول‌های شبه گیرنده نوری تسهیل نماید. این یافته‌ها بیانگر پتانسیل درمانی و نقش تنظیمی miRNAها در تمایز، بقا و حفاظت سلول‌های شبکیه است.   Background: Retinal photoreceptor degeneration is a major cause of blindness. Stem cell therapies offer promise, and the miR-183/96/182 cluster, particularly miR-182 and miR-183, plays a crucial role in photoreceptor development and survival. Targeting these miRNAs may enhance human bone marrow–derived mesenchymal stem cells) hBMSCs (differentiation into photoreceptor-like cells, improving their therapeutic potential. Methods: This in vitro study was conducted from April 2019 to March 2021 at the Clinical Biochemistry Research Center, Shahrekord University of Medical Sciences. hBMSCs were cultured in DMEM with fetal bovine serum and transfected with miR-182 and miR-183 mimics using Lipofectamine, with a scramble miRNA control. Transfection efficiency and miRNA overexpression were evaluated at 24 and 48 hours using real-time PCR. miRNA expression was normalised to Snord, while mRNA levels were normalised to GAPDH using the 2−ΔΔCt method. Photoreceptor-like differentiation was assessed by measuring the expression of retina-specific transcription factors and markers (OTX2, CRX, NRL, SLC1A1, PKCα, Recoverin, and RHO). Statistical analyses included the Shapiro–Wilk test for normality and the Mann-Whitney U test for group comparisons. Data were reported as Mean ± SEM, with 95% confidence intervals, and significance set at α = 0.05. Results: Transfection of miR-182 and miR-183 significantly increased miRNA levels at 24–48 hours (P < 0.001) compared to the scramble control. This led to a marked upregulation of retinal-related genes, including CRX, OTX2, PKCα, Recoverin, NRL, and RHO, indicating activation of the photoreceptor gene network. Time-resolved analysis revealed stronger effects at 24–48 hours, supporting a transient window for pro-differentiation. RHO and CRX exhibited the most significant increases, while OTX2 and PKCα showed parallel rises, suggesting coordinated activation of early and intermediate photoreceptor programs. Scramble controls did not show comparable changes. Conclusion: Transient overexpression of miR-182 and miR-183 in hBMSCs activates a photoreceptor-like gene expression program, promoting differentiation toward photoreceptor-like cells. This finding supports the potential use of miR-182/183 in stem cell-based therapies for retinal degeneration. Further studies should confirm protein expression, functional outcomes, and in vivo efficacy.   سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان انسان, miRNA-182, miRNA-183, سلول‌های گیرنده نوری. human bone marrow-derived mesenchymal stem cells, miRNA-182, miRNA-183, photoreceptor cells. 369 376 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3666-937&slc_lang=other&sid=1 Samaneh Arab سمانه عرب No Department of Tissue Engineering and Applied Cellular Sciences, Faculty of Medicine, Semnan University of Medical Sciences, Semnan, Iran. گروه مهندسی بافت و علوم سلولی کاربردی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی سمنان، سمنان، ایران. Mohammad-Reza Mahmoudian-Sani محمد رضا محمودیان ثانی No Thalassemia and Hemoglobinopathy Research Center, Health research institute, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran. مرکز تحقیقات بیماری‌های تالاسمی و هموگلوبینوپاتی، پژوهشکده سلامت دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران. Najmeh Fattahi نجمه فتاحی No Cellular and Molecular Research Center, Basic Health Sciences Institute, Shahrekord University of Medical Sciences, Shahrekord, Iran. مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، پژوهشکده علوم پایه سلامت، دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد، شهرکرد، ایران. Zakiye Ekhlasi زکیه اخلاصی No Clinical Biochemistry Research Center, Basic Health Sciences Institute, Shahrekord University of Medical Sciences, Shahrekord, Iran. مرکز تحقیقات بیوشیمی بالینی، پژوهشکده علوم پایه سلامت، دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد، شهرکرد، ایران. Samira Asgharzade سمیرا اصغرزاده Asgharzade1396@gmail.com Yes Clinical Biochemistry Research Center, Basic Health Sciences Institute, Shahrekord University of Medical Sciences, Shahrekord, Iran. مرکز تحقیقات بیوشیمی بالینی، پژوهشکده علوم پایه سلامت، دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد، شهرکرد، ایران.