fa بررسی ترکیبات شیمیایی، اثرات آنتی‌اکسیدانی، ضد باکتریایی، سیتوتوکسیک و آپوپتوزی عصاره گیاه به‌لیمو بر روی رده سلولی سرطان کولون مقاله اصیل Original Article <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong><em>زمینه و هدف:</em></strong> گیاه به‌لیمو <span dir="LTR">(Aloysia citrodora)</span> از نظر طب سنتی در ایران حایز اهمیت می‌باشد. هدف این مطالعه بررسی ترکیبات شیمیایی، اثرات آنتی‌اکسیدانی، ضد باکتریایی، سمیت سلولی و آپوپتوزی عصاره گیاه به‌لیمو بر روی رده سلولی سرطان کولون می‌باشد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong><em>روش بررسی: </em></strong>این مطالعه تجربی از فروردین تا شهریور 1394 در دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شرق انجام گرفت. ترکیبات شیمیایی عصاره گیاه به‌لیمو با استفاده از روش <span dir="LTR">Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS)</span> آنالیز شد. اثرات آنتی‌اکسیدانی، ضد باکتریایی و سمیت سلولی عصاره به‌ترتیب از طریق روش <span dir="LTR">DPPH</span>، دیسک دیفیوژن و <span dir="LTR">MTT</span> تعیین شد. مولکول <span dir="LTR">RNA</span> استخراج شد و سپس <span dir="LTR">cDNA</span> ساخته شد. در نهایت، بیان ژن‌های آپوپتوزی <em><span dir="LTR">Bax</span></em> و <em><span dir="LTR">Bcl2</span></em> با روش <span dir="LTR">Real-Time PCR</span> ارزیابی شد و القای آپوپتوز توسط روش فلوسایتومتری مشخص شد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong><em>یافته‌ها:</em></strong> آنالیز فیتوشیمیایی عصاره، تعداد 37 ترکیب را نشان داد که بیشترین میزان مربوط به <span dir="LTR">Spathulenol</span> (57/%17) و <span dir="LTR">Caryophyllene oxide</span> (15/%15) بود. همچنین، عصاره مورد مطالعه دارای <span dir="LTR">mg/ml</span> <a name="OLE_LINK2"></a><a name="OLE_LINK1">03/0</a><span dir="LTR">&plusmn;</span>6/0 <span dir="LTR">IC₅₀=</span> خاصیت آنتی‌اکسیدانی بود. این عصاره بیشترین اثر را بر روی باکتری گرم منفی و کمترین اثر را بر روی گرم مثبت داشت. افزایش بیان ژن <em><span dir="LTR">Bax</span></em> وکاهش بیان <em><span dir="LTR">Bcl2</span></em> به‌ترتیب به‌میزان 72/0&plusmn;47/3 (05/0<span dir="LTR">P</span><span dir="LTR"><</span>) و 35/0&plusmn;43/0 (05/0<span dir="LTR">P</span><span dir="LTR"><</span>) نشان دادند. همچنین، نتایج فلوسایتومتری میزان آپوپتوز 66/38 درصدی را نشان داد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong><em>نتیجه‌گیری: </em></strong>به‌نظر می‌رسد که عصاره گیاه به‌لیمو به‌عنوان گیاهان بومی کشورمان پتانسیل آنتی‌اکسیدانتی، ضد باکتریایی و ضد سرطانی بالایی دارد و پیشنهاد می‌شود که مطالعات بیشتر در مورد اهمیت دارویی این گیاه انجام شود.</p> <p style="text-align: justify;">Background: Aloysia citrodora belongs to the Verbenaceae family of plants, a well-known herbal medicine in Iran. The aim of the present study was to investigate the chemical composition, antioxidant, antibacterial, cytotoxic and apoptotic effect of A. citrodora extract against human colon cancer (HT29) cells by using real-time polymerase chain reaction and flow-cytometry methods.</p> <p style="text-align: justify;">Methods: This experimental study was carried out in Islamic Azad University, East Tehran Branch, from March to September of 2014. At first, the A. citrodora chemical constituents were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) technique. In addition, antioxidant assay, antibacterial and anti-cancer effect was performed using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), disk diffusion and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) methods, respectively. The half maximal inhibitory concentration (IC50) value was calculated. We extracted total RNA molecules by using RNX solution, after which cDNA was synthesized. Finally, the pro-apoptotic (Bax) and anti-apoptotic (Bcl2) gene expression was performed by real-time polymerase chain reaction and apoptotic effects were analyzed using Flow-cytometry method.</p> <p style="text-align: justify;">Results: GC-MS analysis of Aloysia citrodora extract was shown 37 major components and the most frequent component was belonged to Spathulenol (17.57%) and Caryophyllene oxide (15.15%) The antioxidant activity of the extract was IC50= 0.6&plusmn;0.03 mg/ml. The maximum and minimum antibacterial effects of extract were belonged to gram-negative and gram-positive bacteria, respectively. Cytotoxic results revealed that the A.citrodora extract have IC50= 20.1&plusmn;0.78 mg/ml against colon cancer (HT29) cell line and real-time polymerase chain reaction results showed the expression level of Bax and Bcl2 was increased and decreased respectively in colon cancer cell line (3.470&plusmn;0.72 (P< 0.05), 0.43&plusmn;0.35 (P< 0.05)). In addition, the flow-cytometry results indicated the 38.66% apoptosis in colon cancer cell line.</p> <p style="text-align: justify;">Conclusion: According to the results, it seems that A. citrodora extract has potential antioxidant, antibacterial and anticancer effects and it suggested that further studies were performed for A. citrodora pharmaceutical importance.</p> گیاه به‌لیمو, اثرات آنتی‌اکسیدانی, سمیت سلولی, آپوپتوز, فلوسایتومتری Aloysia citrodora, antioxidant activity, apoptosis, cytotoxicity, flow-cytometry 168 176 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1213-8&slc_lang=fa&sid=1 Amir Mirzaie امیر میرزایی amir_mirzaie92@yahoo.com Yes Young Researchers and Elite Club, East Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شرق، تهران، ایران. Seyed Ataollah Sadat Shandiz سید عطااله سادات شاندیز No Young Researchers and Elite Club, East Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شرق، تهران، ایران. Hassan Noorbazargan حسن نوربازرگان No Department of Biotechnology, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه بیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران. Elahe Ali Asgary الهه علی عسگری No Department of Biology, East Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شرق، تهران، ایران.