fa بررسی میزان بیان تلومراز در دو رده سلولی آلوده به ویروس پاپلیومای انسانی پرخطر مقاله اصیل Original Article <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong><em>زمینه و هدف</em></strong>: از مهمترین عوامل ابتلا به سرطان گردن رحم، ویروس پاپلیومای انسانی <span dir="LTR">(HPV)</span> است که با وارد کردن ژنوم خود به ژنوم میزبان، منجر به ضایعات پوستی و در مراحل شدیدتر، سرطان می‌شود. در این سرطان مانند دیگر سرطان‌ها، آنزیم تلومراز بیان بالایی دارد. تلومراز یک آنزیم رونوشت‌ بردار معکوس می‌باشد که از دو جزء پروتیین کاتالیتیکی به نام <span dir="LTR">Human Telomerase Reverse Transcriptase (hTERT)</span> و توالی <span dir="LTR">RNA</span> به نام <span dir="LTR">hTR</span>، تشکیل شده است. در این مطالعه میزان بیان ژن <span dir="LTR">hTERT</span> در این دو نوع رده سلولی بررسی گردید.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong><em>روش بررسی: </em></strong>این مطالعه تجربی (آزمایشگاهی) مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی دانشگاه بقیه‌الله تهران از خرداد ماه 1392 تا اردیبهشت 1393 مورد مطالعه قرار گرفت. به صورت شاهدی از نمونه‌های رده سلولی <span dir="LTR">Caski</span> و <span dir="LTR">Hela</span> استفاده شد که به ترتیب واجد <span dir="LTR">HPV16</span> و <span dir="LTR">HPV18</span> هستند. پس از کشت سلول‌ها، با تکنیک <span dir="LTR">Real-time PCR</span>، پس از نرمال‌سازی شرایط با کمک ژن بیان‌شونده دائمی <span dir="LTR">Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GADPH)</span>، میزان بیان ژن <span dir="LTR">hTERT</span> در دو رده سلولی بررسی شد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong><em>یافته‌ها:</em></strong> طبق داده‌های نمودارهای <span dir="LTR">Real-time PCR</span>، بیان ژن <span dir="LTR">hTERT</span> در رده سلولی سرطانی <span dir="LTR">Caski</span> نسبت به <span dir="LTR">Hela</span> تفاوت آماری معناداری داشت، نتایج به‌دست آمده با استفاده از روش <span dir="LTR">Student&rsquo;s t-test</span>، 0319/0<span dir="LTR">P=</span> را نشان داد. نمودارها در نرم‌افزار <span dir="LTR">GraphPad Prism, version 5 (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, USA)</span> نیز این نتایج را تأیید کرد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong><em>نتیجه‌گیری: </em></strong>به منظور بررسی میزان بیان تلومراز، طراحی پرایمر اختصاصی برای تشخیص هردو رده ویروس سرطانی <span dir="LTR">HPV16</span> و <span dir="LTR">HPV18</span> ضروری به نظر می‌رسد. با این روش می‌توان از <span dir="LTR">hTERT</span> به منظور تشخیص سریع و دقیق‌تر نوع سرطان گردن رحم وابسته به <span dir="LTR">HPV16</span> و یا <span dir="LTR">HPV18</span> استفاده شود.</p> <p style="text-align: justify;"><strong><em>Background</em></strong><strong>:</strong> Human papilloma virus (HPV) is one of the most important factors in cervical cancer. Viral sequences are integrated into the host cell genome. In mild cases the virus causes skin damages, in severe cases it leads to cancer. Like many other cancers, telomerase gene expression was increased in cervical cancer. This enzyme is a reverse transcriptase that contains two common subunits: i) catalytic protein called human telomerase reverse transcriptase (hTERT) and, ii) RNA sequence called hTR. hTERT expression is hardly found in any somatic tissues. Detection of high telomerase activity in human cells, lead to tumor genesis. So hTERT can be used as a diagnostic tool in cancer detection.</p> <p style="text-align: justify;"><strong><em>Methods</em></strong><strong>:</strong> This experimental study was carried out from May 2013 to April 2014 in Nanobiotechnology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences in Tehran, Iran. Caski and Hela cancer cell lines were used which contain HPV16 and HPV18 respectively. Cell lines were cultured and total RNA was extracted. Following normalization agent glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GADPH), hTERT expression level was determining by real-time PCR method. For each sample, the expression level of hTERT and GAPDH were quantified as copy numbers (per reaction) using the standard curve. Finally, hTERT levels in Hela and Caski cell lines were compared quantitatively by t-test using GraphPad statistic software version 5 (San Diego, CA, USA).</p> <p style="text-align: justify;"><strong><em>Results</em></strong><strong>:</strong> According to the charts real-time PCR, hTERT gene expression in Hela and Caski cancer cell lines is significantly different (t=0.0319).</p> <p style="text-align: justify;"><strong><em>Conclusion:</em></strong> All results confirm that hTERT expression levels in Hela and Caski cell lines are significantly different and the level of hTERT expression in the Caski cell line was slightly higher than that of Hela cell line. The significant difference between hTERT mRNA expression levels reported here could be used as a tumor marker for HPV16 and HPV18 in cervical cancer.</p> تلومراز, سرطان گردن رحم, ویروس پاپیلومای انسانی, سرطان زنان cervical, cervix cancer, HPV, telomerase, uterine cervical neoplasms 260 266 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1630-3&slc_lang=fa&sid=1 Maryam Akhtari مریم اختری No Department of Genetics, Science and Research Branch Islamic Azad University, Tehran, Iran. گروه ژنتیک، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران. Mahdi Kamali مهدی کمالی mehkamali@yahoo.co.uk Yes Nanobiotechnology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran. مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه‌الله، تهران، ایران. Gholam Reza Javadi غلامرضا جوادی No Department of Genetics, Science and Research Branch Islamic Azad University, Tehran, Iran. گروه ژنتیک، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران. Seyedeh Razieh Hashemi سیده راضیه هاشمی No Department of Obstetrics and Gynecology, Faculty of Medicine, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه زنان و زایمان، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه‌الله، تهران، ایران.