fa القای ایمنی هترولوگ علیه سویه‌های رایج آنفلوانزا با استفاده از واکسن ژنی بر پایه قطعه HA2 مقاله اصیل Original Article <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>زمینه و هدف:</strong> واکسن‌های اسید نوکلئیک به‌عنوان نسل سوم واکسن‌ها برای کنترل آنفلوانزا به‌ دلیل افزایش سویه<span dir="LTR">‌</span>های نوپدید و بازپدید ویروس و انتقال مستقیم ویروس‌های پرندگان به انسان مورد توجه خاصی قرار گرفته‌اند. مزیت مهم این واکسن‌ها، القای هر دو نوع سیستم ایمنی سلولی و هومورال و کنترل سویه‌های در گردش می‌باشد. مطالعه حاضر با هدف استفاده از قطعه محافظت شده <span dir="LTR">HA2</span> هماگلوتینین آنفلوانزا جهت طراحی یک واکسن ژنی جامع و ارزیابی ایمنی متقاطع آن علیه ویروس‌های رایج انجام شد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>روش بررسی: </strong>این مطالعه توسعه‌ای- کاربردی از آذر 1393 تا تیر 1394 در موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی انجام شد. توالی <span dir="LTR">HA2</span> در وکتور <span dir="LTR">pcDNA3.1</span> بیان شده و به گروه‌های موش <span dir="LTR">Bulb/c</span> تیمار و کنترل با استراتژی <span dir="LTR">Prime/Boost</span> تزریق شد. ایمنی هومورال محافظت کننده متقاطع با بررسی عیار آنتی‌بادی در فواصل زمانی معین با روش <span dir="LTR">Virus neutralization (VN)</span> با دو سروتیپ مختلف ویروس آنفلوانزا (<span dir="LTR">H1N1</span> و <span dir="LTR">H9N2</span>)، ایمنی سلولی با آزمایش <span dir="LTR">Proliferation assay</span> و بی‌ضرری واکسن با بازرسی‌های روزانه واکنش‌های موضعی و عمومی و همچنین آزمایش هیستوپاتولوژی مورد ارزیابی قرار گرفت.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>یافته‌ها:</strong> عیار آنتی‌بادی و ایمنی سلولی در گروه‌های تیمار برای هر دو سروتیپ به‌طور معناداری از گروه کنترل بالاتر بوده و در گروه تیمار با دو بار تزریق یادآور دارای بالاترین عیار بود (01/0<span dir="LTR">P<</span>). در موش‌های تحت آزمایش هیچگونه واکنش موضعی، اثرات پاتولوژیک بافتی، واکنش‌های عمومی و یا مرگ و میر مشاهده نشد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>نتیجه‌گیری: </strong>واکسن ژنی بر پایه قطعه <span dir="LTR">HA2</span> سبب افزایش عیار آنتی‌بادی علیه آنفلوانزا و همچنین تحریک ایمنی سلولی بدون ایجاد عوارض جانبی می‌شود.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Background: </strong>Problems of live and inactivated influenza vaccines such as, increasing emerge and re-emerge viruses with high human mortality, current epidemics of influenza and direct transmission of avian viruses to human, affect the vaccination program. DNA vaccines as third generation of vaccines is specially considered for control of influenza in human and poultry. The main advantage of these vaccines is humoral and cellular immune responses and broad spectrum of using these vaccines for control of circulating strains of influenza. In this study the conserved fragment of HA2 to form of DNA vaccine was designed to induce immunity against influenza viruses and its heterologous protective immunity against these viruses was evaluated.</p> <table align="center" cellpadding="0" cellspacing="0" hspace="0" vspace="0"> <tbody> <tr> <td align="left"> <p style="text-align: justify;"><strong>Methods: </strong>The experimental study was performed in Razi Vaccine and Serum Research Institute from December 2014 to July 2015 in Iran. The HA2 was cloned into pcDNA3.1 to assess the HA2 DNA vaccine and mice were immunized with the generated constructs in a DNA prime-DNA boost regimen in 4 groups. The humoral immune responses were analyzed at defined intervals by VN tests. The safety of the vaccine was evaluated by daily inspection and histopathological examination. For evaluation of cellular immunity, proliferation assay was used.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Results: </strong>The antibody titre and cellular immunity of immunized mice was significantly higher than control group for two serotypes and the highest responses was in the group with two-time boosting (P<0.01). There were no any local, general and histopathology reactions in immunized mice.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Conclusion: </strong>The HA2 DNA vaccine significantly enhanced circulatory antibody responses and cellular immunity against influenza current serotypes. This study showed the highest immune responses were in the group that immunized with HA2 in prime and two boosts. Besides that, this construct did not have any local and general reaction and any side effects in treated mice. So, this construct was introduced as candidate for control of influenza virus serotypes.</p> </td> </tr> </tbody> </table> <div style="clear: both; text-align: justify;"></div> آنفلوانزا, DNA واکسن, HA2, ایمنی متقاطع DNA vaccines, HA2 protein, heterologous immunity, Influenza 545 553 http://tumj.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-5502&slc_lang=fa&sid=1 Sina Soleimani سینا سلیمانی s.soleimani@rvsri.ac.ir Yes Razi Vaccine & Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran. موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران. Shahla Shahsavandi شهلا شاهسوندی No Razi Vaccine & Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran. موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران. Omid Madadgar امید مددگار No Department of Microbiology and Immunology, Faculty of Veterinary Medicine, Tehran University, Tehran, Iran. گروه میکروبیولوژی و ایمونولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران